تفاصيل الوثيقة

نوع الوثيقة : مقال في مؤتمر 
عنوان الوثيقة :
تنقية و دراسة خصائص و كمية كولين كايناز البازلاء المستنسخ
Expression, Purification, Properties and Quantification of Cloned Pea Choline Kinase
 
الموضوع : الأحياء و الكيمياء الحيوية 
لغة الوثيقة : العربية 
المستخلص : يعتبر الفوسفاتيدل كولين المكون الرئيسي لدهون الأغشية غير الكلوروبلاستيدية، وهو المكون الرئيسي لأغلب الأنسجة النباتية. يخلق الفوسفاتيدل كولين في النباتات بمسار السايتيدين ثنائي الفوسفات ـ كولين. ويعتبر الكولين كايناز الإنزيم الأول في هذا المسار. الهدف من هذه الدراسة هو استنساخ كولين كايناز في بكتيريا الاشريشيا كولاي وذلك لتسهيل تنقيته ودراسة خواصه. كما تهدف الدراسة أيضاً إلى قياس مستويات التعبير عن جين كولين كايناز في الأوراق والجذور والطلائع في مراحل عمرية مختلفة للنبات. صممت في البداية بادئتين تحويان على موقعي قيد (حصر) هما إن.سي. أو 1 (NcQI) ب.ج.أل 2(Bgl II) واستخدمتا لعزل الدنا المتمم (cDNA) كامل الطول والمشفر للكولين كايناز من مكتبة الدنا المتمم للبازلاء. تم ربط هذا التسلسل بناقل بي. كيو. أي 60 (pQE-60) وتم التعبير عنه في البكتيريا ( سلالة دي. اتش. بي4، DHB4). أظهر الإنزيم الذي تم التعبير عنه في بكتيريا ايشريشياكولاي كمية معنوية من الناشطية. تمت تنقية الكولين كايناز الذي تم التعبير عنه جزئيا على عمود نيكل ـ نيترايلو ثلاثي حمض الخليك ودرست خصائصه. أظهر الكولين كايناز المستنسخ المنقى جزئيا احتياجه إلى ثلاثي إدينوسين الفوسفات والمغنيسيوم. كما كان الرقم الهيدروجيني المثالي في المدى 7,5 ـ9,5، وكان ثابت ميكائيلس (Km) للكولين هو 6.4 x 104 مولار. تم اختبار المثبطات المحتملة المختلفة ولكن الأورثو فينانثرين فقط كان له ذلك التأثير المعنوي. كما تم قياس مستوى التعبير عن جين الكولين كايناز في الأوراق والجذور والطلائع في المراحل العمرية للبازلاء (4، 15، 30 يوماً) باستخدام تفاعل السلسلة المبلمر ذو الوقت الحقيقي Real-time PCR) حيث ظهر أن مستوى التعبير متشابه بين الأنسجة ولا يختلف كثيراً في المراحل العمرية للنبات. 
اسم المؤتمر : المؤتمر السعودي الثاني للعلوم 
الفترة : من : 24محرم هـ - إلى : 26محرم هـ
من : 15مارس م - إلى : 17مارس م 
سنة النشر : 1425 هـ
2004 م 
عدد الصفحات : 16 
نوع المقالة : مقالة علمية 
مكان الانعقاد : كلية العلوم 
الجهة المنظمة : جامعة الملك عبد العزيز 
تاريخ الاضافة على الموقع : Tuesday, January 13, 2009 

الباحثون

اسم الباحث (عربي)اسم الباحث (انجليزي)نوع الباحثالمرتبة العلميةالبريد الالكتروني
عبد الرحمن الماكليAL-MALKI, N/A باحث رئيسي alalmalkiti@kaau.edu.sa
جون هاروودHARWOD, N/A باحث  
أندي موربيMORBY, N/A باحث مشارك  

الملفات

اسم الملفالنوعالوصف
 5.pdf pdf 

الرجوع إلى صفحة الأبحاث